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生物物理所CRISPR系统中Cascade复合物结构解析获进展
  文章来源:生物物理研究所 发布时间:2014-08-13 【字号: 小  中  大   

  812日,Nature杂志在线发表了澳门赌场生物物理研究所王艳丽研究组关于CRISPR系统中Cascade复合物的研究进展,标题为Crystal structure of the RNA-guided immune surveillance Cascade complex in Escherichia coli。该文揭示了Cascade的晶体结构及其与RNA相互作用的方式。 

  成簇的、有规律间隔的短回文重复序列(clustered regularly interspaeed short palindromic repeatsCRISPR)和它的辅助蛋白(CRISPR-associated, Cas)构成CRISPR/Cas系统,以一种类似于真核生物RNA干扰(RNAi)的作用机制,在原核生物抵抗入侵的噬菌体和质粒的防御系统中发挥着重要作用。CRISPR-Cas系统分为三个类型(I型,II型和III型),大肠杆菌CRISPR/Cas 系统属于I-E型,由5Cas蛋白组成的11个亚基(其中含有1CasA2CasB6CasC1CasD1CasE)以及一段61个核苷酸的成熟crRNACRISPR RNA)组成CascadeCRISPR-associated complex for antiviral defense)复合物。Cascade复合物的质量约为405kDa,外观上呈现出近似于“海马”的结构,王艳丽研究组通过深入研究,获得了分辨率为3.05 ?X射线晶体结构(详见下图)。

  该结构显示,61个核苷酸的crRNA横跨Cascade11个亚基,并与6CasC亚基相互作用,5’3’末端分别被CasDCasE锚定。CrRNA的间隔区序列定位在CasC1-6亚基形成的连续的沟槽中。来自CasC2-65个长β发卡结构穿过crRNA。因此crRNA被分成5个片断,每个片段包括5个堆叠的碱基和一个翻转的碱基。每一个crRNA间隔区片断通过相似的方式与CasC相互作用。进一步的研究显示,crRNA不仅在靶点识别中发挥重要作用,而且也在Cascade的组装中发挥重要作用。该研究为Cascade如何发挥功能提供了重要依据。 

  王艳丽研究组的博士生赵宏图为该文的第一作者,该研究得到科技部、国家自然科学基金以及澳门赌场战略性先导科技专项(B类)的资助,上海光源为该研究提供了重要的技术支持 

  文章链接 

 

CRISPR系统中Cascade复合物结构解析

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